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深圳市今发展生物科技有限公司

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miRNA 过表达

通过人工干预提高细胞内miRNA的表达水平是miRNA研究最常用的技术手段。研究者可以通过转染miRNA类似物(miRNA mimic) pre-/pri-miRNA表达质粒以提高细胞内miRNA水平。研究表明,转染含有pre-miRNA及其两端侧翼序列(100-200 bp)pri-miRNA表达载体,能在最大程度上模拟miRNA在体内的合成过程,因此被众多研究者青睐。Geneup公司设计的miRNA过表达载体,分为组成型和诱导型两类。

(一)miRNA过表达载体

1. pLVc-200 (pLVc/CMV-EGFP.miRNA)miRNA组成型过表达载体

载体特征:

u  CMV启动子驱动下游标记蛋白EGFPmiRNA的共表达;

u  共表达的EGFP可快速便捷地检测转染或感染效率;

u  既可用于瞬时转染,也可包装成慢病毒感染细胞;

u  与第四代慢病毒包装质粒匹配,可制备高滴度慢病毒颗粒;

u  含有嘌呤霉素(puromycin)抗性筛选基因,可筛选稳定表达细胞系。

载体图谱:

pLVc-200.jpg

2. pLVi-201 (pLVi/TRE3G-RFP.miRNA)miRNA诱导型过表达载体

载体特征:

u  将新一代四环素反应元件(TRE3G)和四环素激活因子(TetON3G)反向克隆到同一慢病毒载体,能显著提高诱导效果,并降低本底;

u  红色荧光蛋白(RFP作为报告基因,只有在添加强力霉素(DOX)情况下,RFP及其下游的miRNA才能共表达

u  既可用于瞬时转染,也可包装成慢病毒感染细胞;

u  与第四代慢病毒包装质粒匹配,可制备高滴度慢病毒颗粒;

u  含有嘌呤霉素(puromycin)抗性筛选基因,可筛选稳定表达细胞系。

载体图谱:

pLVi-201.jpg

3. pLVi-202 (pLVi/TETO7-RFP.miRNA)miRNA诱导型过表达载体。

载体特征:

u  将第三代四环素反应元件(TETO7)和四环素激活因子(rtTA3)同向克隆在慢病毒载体;

u  红色荧光蛋白(RFP作为报告基因,只有在添加强力霉素(DOX)情况下,RFP及其下游miRNA才能共表达

u  既可用于瞬时转染,也可包装成慢病毒感染细胞;

u  与第四代慢病毒包装质粒匹配,可制备高滴度慢病毒颗粒;

u  含有嘌呤霉素(Puromycin)抗性筛选基因,可筛选稳定表达细胞系。

载体图谱:

pLVi-202.jpg

(二)、 miRNA表达文库

Geneup公司拥有由700多个最常见人源pri-miRNA过表达载体组成的miRNA表达文库。如果下表中没有您需要的miRNA,可以委托本公司定制。

(三)、 miRNA过表达慢病毒包装服务

慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1(人类免疫缺陷I型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体,可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,达到持久性表达的效果。慢病毒可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,具有广阔的应用前景。Geneup公司为您提供高质量的miRNA过表达慢病毒包装服务。