(一) S-Poly(T) ®法，一种新的miRNA实时荧光定量PCR检测方法，Geneup公司明星产品。
实时荧光定量PCR技术是当前miRNA检测中最灵敏、最常用的技术手段，主要包括： poly(A)加尾法；茎环引物（Stem-loop）法和S-Poly(T)®法，其优缺点见下图：
图1. miRNA qRT- PCR检测方法的比较
S-Poly(T)法简介：
S-Poly(T)®是本公司自主研发的miRNA检测新方法，获得第14届中国国际高新技术成果交易会“优秀产品奖”，已获得中国发明专利授权（专利号：201110101438.5），并申请了美国和欧洲发明专利。与其它方法相比，S-Poly(T)®技术在灵敏度和特异性等方面得到显著提高，既能从组织和细胞中检测miRNA，又能从血清/血浆、尿液、石蜡组织等含量甚微的样品中检测miRNA的表达水平，而且适合于miRNA的高通量筛选。Geneup公司现已开发的miRNA检测试剂盒覆盖了miRBase数据库（V20）中人、小鼠、大鼠、猪、牛、羊、斑马鱼、鸡和常见病毒等物种的成熟miRNA，用户可以订购检测试剂盒，也可以委托本公司进行专业技术服务。
S-Poly(T)法检测miRNA原理:
S-Poly(T)®法融合了传统的Stem-loop法和Poly(A)加尾法的优点，使用了与miRNA 3`端特异互补的~6个碱基和11个d(T)组成的S-Poly(T)®特异性逆转录引物，在较高温度下(≥42°C)对加尾后的miRNA进行第一链cDNA的合成，不仅显著提高S-Poly(T)逆转录引物与目的miRNA互补结合的特异性和热稳定性，而且逆转录效率更高，从而大幅提高目的miRNA第一链cDNA的合成及后续qPCR效率。qPCR反应使用特异上游引物、通用下游引物和通用荧光探针对miRNA进行检测。示意图如下：
图2. S-Poly(T)法检测miRNA原理图
