直扩PCR试剂盒
利用高耐受性Taq聚合酶,VitaNavi Tech公司开发了一系列直扩PCR和qPCR试剂盒。这部分产品可用于全血、血清/血浆、FTA卡、动植物组织和细胞等样本的直接扩增,既可以进行常规PCR,也可以进行实时荧光定量PCR。
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实例 5:不同DNA聚合酶以及Direct Blood PCR Kit扩增效果比较
图5. 用OmniTaq, Omni klentaq LA, Solo Taq和 Direct Blood PCR Kit从人EDTA抗凝全血中扩增CCR5基因(1.1 kp)。分别取10 ng(泳道1)、1.25, 2.5, 5, 10 µl(泳道2~5)全血和5 µl全血加上PEC(泳道6)全血,加入25 µl直扩PCR体系,反应35个循环。不同产品对全血的耐受性从高到低依次为:Direct Blood PCR Kit > Solo Taq > Omni klentaq LA > OmniTaq.
实例 6:使用Direct S/P PCR Kit从血浆中一步扩增鼠痘病毒基因
图6. 用Direct S/P PCR Kit从血浆中检测鼠痘病毒。将鼠痘病毒10倍梯度稀释,加入肝素抗凝血浆;取1.25 µl血浆(5%, v/v)加入25 µl直扩PCR体系,反应35个循环。纯化的病毒DNA为阳性对照(0),不加模板组为阴性对照(N)。结果:Direct S/P PCR Kit能从血浆中扩增鼠痘病毒,具有较高灵敏性。
实例 7:使用Direct FTA PCR Kit从FTA卡保持的血浆中一步扩增目的基因
图7. 用Direct FTA PCR Kit从无抗凝剂全血(FTA_A)或肝素抗凝全血(FTA_B)的血卡中检测人1.2 kb基因。
实例 8:使用Direct plant PCR Kit从大豆或西红柿叶子中一步扩增目的基因
图8. 用Direct plant PCR Kit从大豆或西红柿叶子检测目的基因。取直径1.2 mm的叶片组织,加入25 µl PCR体系中进行反应。
实例9:用Direct Blood qPCR SYBR Green kit从5%的全血中直扩疱疹病毒
图9. 将单纯性疱疹病毒系列稀释后与人全血混合,用Direct Blood qPCR SYBR Green kit进行直扩荧光定量PCR。结果:该试剂盒实现从5%全血中检测疱疹病毒。
实例10:用Direct S/P qPCR TaqProbe Kit从血浆中定量分析鼠痘病毒基因
VitaNavi Technology产品选购
Taq Enzymes |
Hot Start |
Inhibitor |
TaqMan |
Fast |
Long & |
5X PCR Kit |
Klentaq1 |
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Klentaq1 LA |
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+ |
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+ |
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OmniTaq |
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++ |
+ |
+ |
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+ |
OmniTaq LA |
+ |
++ |
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+ |
+ |
+ |
Omni Klentaq |
+ |
++ |
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+ |
Omni Klentaq LA |
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Cesium Taq |
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+ |
CesiumTaq LA |
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Cesium Klentaq AC |
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Cesium Klentaq AC LA |
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Cesium Klentaq C |
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Cesium Klentaq C LA |
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Solo Taq |
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Solo Taq LA |
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Alpha Taq |
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Alpha Taq LA |
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